常见微生物污染类型
细菌污染
细菌污染是细胞培养中较为普遍的状况。细菌繁殖能力惊人，能在短时间内迅速改变培养液的理化性质。一旦受到细菌污染，培养液很快会变得浑浊，颜色也可能发生改变，如变成黄色或红色。借助显微镜观察，会发现大量形态各异的细菌，如球状、杆状等，它们在细胞间隙中快速穿梭，干扰细胞正常贴壁和生长，严重时甚至会导致细胞死亡。
真菌污染
真菌污染在细胞培养中也时常出现，主要包括霉菌和酵母菌。在污染初期，培养液中可能出现白色或浅黄色的小点，随着培养时间延长，这些小点会逐渐发展成丝状、绒毛状或絮状的菌丝体。真菌会消耗培养液中的营养成分，改变培养液的 pH 值，并且可能分泌毒素，抑制细胞生长和代谢，使细胞形态发生改变，甚至脱落死亡。
支原体污染
支原体是一类没有细胞壁的原核微生物，体积微小，能够通过常规的细菌过滤器，这使得支原体污染隐蔽性。细胞受到支原体污染后，生长速度会减缓，形态变得不规则，细胞核可能出现异常，如核仁增大、核膜破裂等。由于支原体污染难以察觉，往往在细胞培养一段时间后才发现，这对实验结果的准确性造成了严重影响。
细胞培养室的空气、地面和工作台面若清洁不到位，就会成为微生物滋生的温床。空气中的尘埃粒子可能携带细菌、真菌孢子，在操作过程中落入培养体系；地面上的微生物也可能通过人员走动、物品移动等方式进入培养区域。此外，培养箱、超净工作台等设备若不定期清洁和消毒，内部会积累大量微生物，成为潜在的污染源。
细胞培养过程中使用的各种器材，如培养瓶、吸管、离心管等，若灭菌不彻底，残留的微生物会在培养过程中大量繁殖，引发污染。即使经过灭菌处理的器材，如果在储存或使用过程中受到污染，同样会引入微生物。
操作人员的不当操作是导致微生物污染的重要原因之一。例如，在超净工作台内操作时，未正确穿戴无菌工作服、口罩和手套，或者在操作过程中频繁走动、说话，都可能将空气中的微生物带入培养体系。此外，不规范的移液、换液等操作，也容易造成器材和培养液的污染。
培养基和血清是细胞生长的营养来源，如果它们本身受到微生物污染，那么在细胞培养过程中，污染的微生物会迅速生长繁殖。一些质量不合格的血清可能含有支原体、细菌等微生物，而培养基在配制、储存和使用过程中，若操作不当，也容易被污染。
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