体外细胞培养的条件近乎苛刻。所有使用物品要洁净、无菌。所有操作过程要在无菌环境中。也就是说细胞培养过程中时刻面临着微生物的污 染。由于微生物生长繁殖的速度远远超过哺乳类动物细胞,培养细胞一旦发生污染,就意味着培养的失败。即使细胞侥幸存活,其功能和性质也往往会发生改变,无法作为实验模型进行研究工作。
细胞体外培养过程中,常见的污染包括细菌污染、霉菌污染及支原体污染,还有细胞间的交叉污染。后者只要足够重视,操作不同细胞时使用不同的工具或分别进行即可避免。细菌和霉菌污染在显微镜下甚至是肉眼就很容易识别。细菌污染时,培养瓶中的培养液变酸、变浑浊,显微镜下,细胞间大量活跃运动的细小颗粒,细胞大量死亡。霉菌污染时,严重时可见霉菌团块,漂浮 在培养液中,显微镜下可见不同形态的霉菌菌丝。只有支原体污染,较难识别。常常对培养细胞的支原体的污染估计不足或被忽略。支原体污染可使研究结果的真实性和可靠性大大下降。 由于竞争营养及支原体有毒的代谢产物, 支原体污染可显著影响生产用细胞的培养及相应生物技术的发挥, 影响生物制品的生产。
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